毛細(xì)管電泳儀又稱高效毛細(xì)管電泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE),是一類以毛細(xì)管為分離通道、以高壓直流電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力的新型液相分離技術(shù)。
毛細(xì)管電泳實(shí)際上包含電泳、色譜及其交叉內(nèi)容,它使分析化學(xué)得以從微升水平進(jìn)入納升水平,并使單細(xì)胞分析,乃至單分子分析成為可能。
雙電層是指兩相之間的分離表面由相對(duì)固定和游離的兩部分離子組成的與表面異號(hào)的離子層,凡是浸沒在液體中的界面都會(huì)產(chǎn)生雙電層。在毛細(xì)管電泳中,無論是帶電粒子的表面還是毛細(xì)管管壁的表面都有雙電層。
毛細(xì)管電泳實(shí)際上包含電泳、色譜及其交叉內(nèi)容,它使分析化學(xué)得以從微升水平進(jìn)入納升水平,并使單細(xì)胞分析,乃至單分子分析成為可能。長(zhǎng)期困擾我們的生物大分子如蛋白質(zhì)的分離分析也因此有了新的轉(zhuǎn)機(jī)。
毛細(xì)管電泳通常使用內(nèi)徑為25-100 μm 的彈性(聚酰亞胺)涂層熔融石英管。
標(biāo)準(zhǔn)毛細(xì)管的外徑為375 μm,有些管的外徑為160 μm。
毛細(xì)管的特點(diǎn)是:容積小(一根100 cm×75 μm 管子的容積僅4.4 μL);側(cè)面/截面積比大,因而散熱快、可承受高電場(chǎng)(100-1000 V/cm);可使用自由溶液、凝膠等為支持介質(zhì);在溶液介質(zhì)下能產(chǎn)生平面形狀的電滲流。
由此,可使毛細(xì)管電泳具備如下優(yōu)點(diǎn):
(1) 高效 塔板數(shù)目在105-106 片/m 間,當(dāng)采用CGE 時(shí),塔板數(shù)目可達(dá)107 片/m 以上;
(2) 快速 一般在十幾分鐘內(nèi)完成分離;
(3) 微量 進(jìn)樣所需的樣品體積為nL 級(jí);
(4) 多模式 可根據(jù)需要選用不同的分離模式且僅需一臺(tái)儀器;
(5) 經(jīng)濟(jì) 實(shí)驗(yàn)消耗不過幾毫升緩沖溶液,維持費(fèi)用很低;
(6) 自動(dòng) CE 是目前自動(dòng)化程度較高的分離方法。